在哺乳动物细胞的细胞质中传递蛋白质的新方法被广泛报道。然而，要以定量的方式区分这些方法是很困难的，大多数评估细胞质蛋白传递的方法都是定性的和间接的。Wissner等人利用荧光相关光谱(FCS)来精确而准确地测定7种不同的先前报道的细胞穿透肽(CPPs)将自标记酶SNAP-tag运输到胞质膜以外的细胞质中的相对效率。实验发现微型蛋白ZF5.3是一种特殊的载体，可以将SNAP-tag传递到细胞质中。通过ZF5.3递送的SNAP-tag可以获得高达250 nM的细胞质浓度，比其他任何的CPP高2倍和6倍。实验也证明ZF5.3可以融合到第二种酶中，即工程过氧化物酶APEX2，并可靠地将活性酶传递到细胞内部。Wissner, R.F., Steinauer, A. et al. Fluorescence Correlation Spectroscopy Reveals Efficient Cytosolic Delivery of Protein Cargo by Cell-Permeant Miniature Proteins.ACS Central SicenceDOI: 10.1021/acscentsci.8b00446https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acscentsci.8b00446